Bạn có thể trình tự sản phẩm PCR không?
Bạn có thể trình tự sản phẩm PCR không?

Video: Bạn có thể trình tự sản phẩm PCR không?

Video: Bạn có thể trình tự sản phẩm PCR không?
Video: KỸ THUẬT PCR 2024, Tháng mười một
Anonim

Trực tiếp Giải trình tự của Sản phẩm PCR . Nó hoàn toàn có thể trực tiếp sự nối tiếp Một Sản phẩm PCR mà không cần sao chép đoạn đầu tiên. Trực tiếp Giải trình tự PCR hiếm khi thành công trừ khi bạn dành một chút thời gian để đảm bảo rằng bạn không rơi vào một trong số rất nhiều bẫy.

Theo cách này, PCR giải trình tự là gì?

Trực tiếp Giải trình tự của PCR Các sản phẩm. Bạn phải loại bỏ tất cả PCR mồi và nucleotide chưa hợp nhất trước khi sản phẩm là trình tự . Giải trình tự chỉ sử dụng một lớp sơn lót thay vì hai lớp sơn lót được sử dụng trong PCR . Nếu bạn không loại bỏ cả hai mồi, bạn sẽ nhận được hai trình tự chồng lên nhau mà không thể đọc được.

Tương tự, tôi có thể sử dụng mồi PCR để giải trình tự không? Mồi PCR được dành cho PCR khuếch đại để thu được một amplicon. Trình tự các mồi là đã sử dụng đến sự nối tiếp một đoạn DNA và tiết lộ DNA của nó sự nối tiếp nhận định. 4. Hai Mồi PCR cần thiết trong một PCR phản ứng (thường); chỉ một giải trình tự mồi được thêm vào một trình tự sự phản ứng lại.

Theo quan điểm này, bạn kiểm tra sản phẩm PCR như thế nào?

Phát hiện và phân tích Sản phẩm PCR . Các sản phẩm của một PCR phải là một đoạn hoặc các đoạn DNA có chiều dài xác định. Nhiều kỹ thuật có thể được sử dụng để phát hiện chuỗi khuếch đại (xem Bảng). Kỹ thuật đơn giản nhất và thường được sử dụng là điện di của Sản phẩm PCR trên gel agarose với EtBr (ethidium bromide).

Tại sao cần phải tinh chế sản phẩm PCR trước khi giải trình tự?

Thanh lọc DNA từ một PCR phản ứng thường là cần thiết cho sử dụng hạ nguồn, và tạo điều kiện thuận lợi cho việc loại bỏ các enzym, nucleotide, mồi và các thành phần đệm.

Đề xuất: