Làm thế nào chính xác là giải trình tự Sanger?

2024 Tác giả: Stanley Ellington | [email protected]. Sửa đổi lần cuối: 2023-12-16 00:25

Sanger trình tự với 99,99% sự chính xác là "tiêu chuẩn vàng" cho nghiên cứu lâm sàng trình tự . Tuy nhiên, các công nghệ NGS mới hơn cũng đang trở nên phổ biến trong các phòng thí nghiệm nghiên cứu lâm sàng do khả năng thông lượng cao hơn và chi phí cho mỗi mẫu thấp hơn.

Cũng được hỏi, tại sao NGS tốt hơn Sanger?

Sanger trình tự chỉ có thể trình tự một đoạn tại một thời điểm. Tại vì NGS sử dụng các tế bào dòng có thể liên kết hàng triệu đoạn DNA, NGS có thể đọc tất cả các chuỗi này cùng một lúc. Tính năng thông lượng cao này làm cho nó rất hiệu quả khi giải trình tự một lượng lớn DNA.

Ngoài ra, điểm của trình tự Sanger là gì? Sanger trình tự là quá trình kết hợp có chọn lọc các dideoxynucleotide kết thúc chuỗi bởi DNA polymerase trong quá trình sao chép DNA trong ống nghiệm; nó là phương pháp được sử dụng rộng rãi nhất để phát hiện SNV.

Sau đó, người ta cũng có thể hỏi, sự khác biệt giữa giải trình tự Sanger và giải trình tự thế hệ tiếp theo là gì?

Kế tiếp - trình tự thế hệ (NGS) công nghệ cũng tương tự. Quan trọng sự khác biệt giữa giải trình tự Sanger và NGS là trình tự âm lượng. Trong khi Sanger chỉ phương pháp trình tự một đoạn DNA duy nhất tại một thời điểm, NGS song song rất nhiều, trình tự hàng triệu mảnh đồng thời mỗi lần chạy.

Trình tự kết thúc chuỗi hoạt động như thế nào?

DNA sáng hơn trình tự còn được gọi là chuỗi - chấm dứt phương pháp của trình tự . ddNTPs dẫn đến chấm dứt của sợi DNA vì ddNTPs thiếu nhóm 3'-OH cần thiết cho sự hình thành liên kết phosphodiester giữa các nucleotide. Nếu không có sự ràng buộc này, chuỗi nucleotide được hình thành là chấm dứt.