Enzyme giới hạn được sử dụng như thế nào khi thực hiện điện di trên gel?

2024 Tác giả: Stanley Ellington | [email protected]. Sửa đổi lần cuối: 2023-12-16 00:25

1 Câu trả lời. Để cắt DNA, RNA hoặc plasmid tại sự hạn chế các vị trí (như EcoRI, BamHI, hindIII và BglII) để tạo ra các đoạn gen nhỏ hơn có thể được tách ra và do đó được đặc trưng bằng cách sử dụng điện di gel.

Tương tự, người ta có thể hỏi, đó là vai trò của các enzym giới hạn?

MỘT enzyme hạn chế là một protein nhận biết một trình tự nucleotide ngắn, cụ thể và chỉ cắt DNA tại vị trí cụ thể đó, được gọi là sự hạn chế trình tự trang web hoặc mục tiêu. Trong vi khuẩn sống, chức năng của enzym giới hạn để bảo vệ tế bào chống lại các vi khuẩn vi rút xâm nhập.

Ngoài ra, làm thế nào để bạn biết nên sử dụng loại enzyme hạn chế nào? Khi chọn các enzym giới hạn, bạn muốn chọn các enzym:

1. Làm nghiêng phần chèn của bạn, nhưng không cắt bên trong phần chèn của bạn.
2. Có ở vị trí mong muốn trong plasmid người nhận của bạn (thường là ở vị trí đa nhân bản (MCS)), nhưng không cắt ở nơi khác trên plasmid.

Bên cạnh đó, các enzym giới hạn được sử dụng như thế nào trong nghiên cứu?

Trong phòng thí nghiệm, các enzym hạn chế (hoặc endonucleases hạn chế ) là đã sử dụng để cắt DNA thành các đoạn nhỏ hơn. Các vết cắt luôn được thực hiện ở các trình tự nucleotide cụ thể. Khác nhau các enzym hạn chế nhận biết và cắt các chuỗi DNA khác nhau.

Vai trò của điện di trên gel là gì?

Điện di trên gel là kỹ thuật dùng để tách các đoạn DNA theo kích thước của chúng. Các mẫu DNA được nạp vào các giếng (vết lõm) ở một đầu của gel , và một dòng điện được áp dụng để kéo chúng qua gel . Các đoạn DNA mang điện tích âm nên chúng di chuyển về phía điện cực dương.