Tại sao một enzym giới hạn sẽ không bị cắt?
Tại sao một enzym giới hạn sẽ không bị cắt?

Video: Tại sao một enzym giới hạn sẽ không bị cắt?

Video: Tại sao một enzym giới hạn sẽ không bị cắt?
Video: Cách xác định vị trí cắt enzyme giới hạn - RestrictionMapper 2024, Tháng mười một
Anonim

Có thể có một số lý do khác nhau khiến enzyme giới hạn không cắt DNA như được xem xét trong video này. Quá trình chuẩn bị DNA được phân cắt Nên không có chất gây ô nhiễm như phenol, cloroform, cồn, EDTA, chất tẩy rửa hoặc quá nhiều muối, tất cả đều có thể gây cản trở enzyme hạn chế hoạt động.

Về vấn đề này, tại sao các enzym giới hạn không cắt DNA của vi khuẩn?

Vi khuẩn có các enzym hạn chế , còn được gọi là endonucleases hạn chế , cái mà cắt mạch kép DNA tại các điểm cụ thể thành các mảnh. Một cách thú vị, các enzym hạn chế không phân chia của riêng họ DNA . Vi khuẩn ngăn chặn của riêng họ DNA từ chặt bởi enzyme hạn chế thông qua quá trình metyl hóa của sự hạn chế các trang web.

Người ta cũng có thể hỏi, các enzym giới hạn cắt ở đâu? Enzyme hạn chế Các loại Nói chung, Loại I enzym cắt DNA ở các vị trí xa với trình tự nhận biết; Loại II cắt DNA bên trong hoặc gần với trình tự nhận biết; Loại III cắt DNA gần các trình tự nhận dạng; và Loại IV phân cắt DNA bị metyl hóa.

Tương tự, người ta hỏi, điều gì sẽ xảy ra nếu bạn thêm quá nhiều enzym giới hạn?

Tiêu hóa không hoàn toàn có thể xảy ra khi quá nhiều hoặc quá ít men Được sử dụng. Các sự hiện diện của chất gây ô nhiễm trong NS Mẫu DNA có thể ức chế các enzym , cũng dẫn đến tiêu hóa không hoàn toàn. Một vài các enzym hạn chế yêu cầu đồng yếu tố để hoạt động đầy đủ.

Tại sao thông báo hạn chế của tôi không hoạt động?

Không đầy đủ hoặc không tiêu hóa do hoạt động của enzym bị chặn bởi quá trình methyl hóa DNA. Nếu enzym của bạn đang hoạt động và tiêu hóa kiểm soát DNA và NS phản ứng được thiết lập bằng cách sử dụng các điều kiện tối ưu, nhưng bạn vẫn thấy vấn đề với tiêu hóa , nó có thể là bởi vì NS enzyme bị ức chế bởi sự metyl hóa của NS DNA khuôn mẫu.

Đề xuất: