Mục lục:

Làm thế nào để bạn chèn một gen vào một plasmid?
Làm thế nào để bạn chèn một gen vào một plasmid?

Video: Làm thế nào để bạn chèn một gen vào một plasmid?

Video: Làm thế nào để bạn chèn một gen vào một plasmid?
Video: Giải trình tự DNA 2024, Tháng mười một
Anonim

Các bước cơ bản là:

  1. Cắt mở plasmid và "dán" vào gien . Quá trình này dựa vào các enzyme giới hạn (cắt DNA) và DNA ligase (tham gia DNA).
  2. Chèn NS plasmid thành vi khuẩn.
  3. Lớn lên rất nhiều plasmid - tạo ra vi khuẩn và sử dụng chúng như "nhà máy" để tạo ra protein.

Ngoài ra, làm thế nào một gen có thể được chèn vào GCSE plasmid?

nó là được chèn vào một plasmid sử dụng enzym ligase. NS plasmid đi vào trong một tế bào vi khuẩn. vi khuẩn chuyển gen sinh sản, kết quả là trong hàng triệu vi khuẩn giống nhau sản xuất insulin của con người.

Ngoài ra, làm thế nào để bạn Subclone gen? Các bước cơ bản cho Subcloning Bạn giải phóng và làm sạch phần chèn của mình khỏi vectơ mẹ, điều chỉnh đoạn chèn này vào một vectơ đích đã chuẩn bị sẵn, biến đổi phản ứng nối này thành các tế bào vi khuẩn có thẩm quyền. Sau đó, bạn sàng lọc các ô đã biến đổi để chèn.

Hãy xem xét điều này, 4 bước của quá trình nhân bản gen là gì?

Trong các giao thức nhân bản thắt và tiêu hóa enzym giới hạn cổ điển, việc nhân bản bất kỳ đoạn DNA nào về cơ bản bao gồm bốn bước:

  • phân lập DNA quan tâm (hoặc DNA đích),
  • thắt,
  • chuyển đổi (hoặc chuyển đổi), và.
  • một thủ tục sàng lọc / lựa chọn.

Làm thế nào để bạn khuếch đại một plasmid?

Quy trình thí nghiệm

  1. Chạy PCR và tinh sạch sản phẩm PCR: Chạy PCR để khuếch đại DNA chèn của bạn.
  2. Tiêu hóa DNA của bạn:
  3. Cô lập chèn và vectơ của bạn bằng cách làm sạch gel:
  4. Ghép đoạn chèn vào vectơ của bạn:
  5. Chuyển đổi:
  6. Phân lập Plasmid đã hoàn thành:
  7. Xác minh Plasmid của bạn bằng cách giải trình tự:

Đề xuất: